FISH (fluorescenční in situ hybridizace) je laboratorní technika používaná v molekulární biologii a genetice k detekci a lokalizaci specifických sekvencí DNA nebo RNA v buňkách a tkáních. Tato metoda je velmi přesná a umožňuje vizualizaci genů nebo jiných genetických materiálů přímo v místě, kde se nacházejí na chromozomech nebo v buňkách.
Jak FISH funguje?
1. Příprava vzorku: Buňky nebo tkáně jsou fixovány na sklíčko a ošetřeny tak, aby došlo k otevření chromozomů nebo jádra, což umožní přístup ke genetickému materiálu.
2. Hybridizace: Specifické fluorescenčně značené DNA nebo RNA sondy, které jsou komplementární k cílové sekvenci, se přidají k připravenému vzorku. Tyto sondy se připojí (hybridizují) k odpovídajícím sekvencím DNA nebo RNA v buňce.
3. Detekce: Po hybridizaci se vzorek promyje, aby se odstranily nenavázané sondy. Při použití fluorescenčního mikroskopu lze následně vizualizovat oblasti, kde se sondy připojily k cílovým sekvencím, což se projeví jako fluorescenční signál na sklíčku.
Sponzorováno
Kdy se FISH používá?
Diagnostika genetických poruch: FISH je často používána k detekci chromozomálních abnormalit, jako jsou delece, duplikace, translokace a aneuploidie. Příkladem je detekce genetických změn spojených s Downovým syndromem nebo jinými chromozomálními poruchami.
Onkologie: V onkologii se FISH používá k identifikaci specifických genových změn v nádorových buňkách, které mohou ovlivnit prognózu a výběr léčby. Například detekce amplifikace genu HER2 u rakoviny prsu může indikovat vhodnost léčby specifickými léky.
Prenatální testování: FISH může být použita v prenatální diagnostice k rychlému zjištění některých genetických abnormalit u plodů.
Výhody
FISH je velmi specifická, rychlá a citlivá metoda, která umožňuje vizualizaci genetických změn přímo v buněčném kontextu. Může být použita na fixovaných i živých buňkách.
Nevýhody
Sponzorováno
Omezený počet sond, které mohou být najednou použity na jeden vzorek, a relativně vyšší cena. Také vyžaduje kvalitní technické zázemí a odborné znalosti pro interpretaci výsledků.
Autor článku
Líbil se vám náš článek? Sdílejte ho, uděláte nám radost
Přečtěte si také naše další články